PG电子酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种用于特定抗原或抗体的定性和定量检测技术。该方法涉及将可溶性抗原或抗体结合到聚苯等固相载体上，通过抗原与抗体之间的特异性结合进行免疫反应。ELISA的主要目的是在血清、尿液和细胞上清等样本中检测特定抗原，从而实现定性诊断。

ELISA的基本原理是将已知的抗原或抗体吸附到固相载体表面，然后在固相表面执行带有酶标记的抗原抗体反应。实验步骤首先包括设定标准孔、空白孔和样本孔。标准孔中加入100μL倍比稀释的标准品，空白孔中加入100μL标准品与样本稀释液，其余孔中则加入100μL待测样本。建议所有待检样本和标准品都设立复孔，并通过预实验或技术支持来确定样本的合理稀释倍数。

随后的步骤包括给酶标板覆膜，并在37℃下孵育90分钟。在加样时，要将样品轻轻放入酶标板底部，尽量避免接触孔壁，并轻轻晃动以混匀，控制加样时间在10分钟以内。甩尽孔内液体后，加入生物素化抗体工作液100μL，继续在37℃温育1小时。重复甩气体和用洗涤液清洗的步骤，以保证结果的准确性。

接着，加入HRP酶结合物工作液100μL，在37℃下孵育30分钟。之后再进行洗板操作，同样进行多次清洗以消除非特异性结合。然后加底物溶液（如TMB），在37℃条件下避光孵育15分钟，显色后即可进行测定。

测定反应后，加入终止液，并使用酶标仪在450nm波长下测量各孔的光密度（OD值）。值得注意的是，由于实验条件的不同，标准曲线的OD值可能会有所差异，从而影响最终结果。以下的标准曲线（NE浓度与OD值的关系）仅供参考，用于后续的分析和比对。

关于样本的处理，血清、血浆或其他液体样本通常需要使用100μL进行检测。若使用全血样本，则需在4℃下保存并送检，经过分离处理后约可获得100-200μL的血清。而对于组织样本，建议最少取0.1g（相当于黄豆大小），最终能获得约500μL的匀浆上清液，可用于5个指标的检测，组织样本需在-20℃下冷冻保存后送检。

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