PG电子提供的稀释法测定最小抑菌浓度（MIC）是一种评估抗菌剂抑制微生物生长能力的重要实验技术。目前主要采用微量稀释法和常量肉汤稀释法。这两种方法各有特点：琼脂稀释法操作简便、成本低廉，适合高通量筛选，尤其适合于自动化操作及精确控制药物浓度；而肉汤稀释法则直观易懂，适合实验室规模的检测，并可根据实验需求灵活调整药物浓度和培养基体积。

琼脂稀释法

PG电子的琼脂稀释法原理是将不同浓度的抑菌剂混合溶解于琼脂培养基中，随后接种细菌。通过观察细菌的生长与否，确定抗菌物质抑制受试菌生长的最低浓度，即最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration, MIC)。这种方法特别适用于不溶性抗菌产品。

操作步骤

• 抗菌液配制：在无菌操作下，取5ml或5g（固体研磨后）样品，加入45ml灭菌磷酸缓冲液中，充分震荡，使其成为10%的均匀溶液或悬液。
• 抗菌剂培养基制备：将以上10%的抗菌溶液用PBS进行系列稀释，获得不同浓度的受试液，置于45℃至50℃的水浴中备用。
• 双倍浓度培养基准备：称取76g MH琼脂培养基，溶于1000ml水中，加热至沸腾后121℃高压蒸汽灭菌15分钟，随后置于45℃至50℃水浴中备用，此培养基用于稀释抗菌溶液。
• 抗菌液培养基的制备：将10ml系列稀释的抗菌液加入平皿中，随后添加10ml的双倍MH琼脂培养基，摇晃平板使其充分混合，待其固化。
• 菌悬液接种：用加样器取1μl至2μl（菌量约为10⁷ cfu/ml）的菌悬液点种于含抗菌液的平皿上，接种后菌液圈的直径应为5mm至8mm（每个点菌量约为10⁴ cfu）。
• 阳性对照：同样方法接种不含抗菌成分的MH琼脂平板。
• 培养结果观察：将接种后的平板放置于35℃培养箱中倒置培养18小时至24小时，观察生长结果。

评估标准

当观察到菌落生长完全被抑制的最低抗菌液浓度即为该样品对受试菌的MIC，而单一菌落的生长可忽略不计。

营养肉汤稀释法

PG电子的营养肉汤稀释法是将不同浓度的抑菌剂溶解于营养肉汤培养基中，通过接种细菌来确定抗菌剂抑制受试菌生长的最低浓度即为MIC，适用于可溶性抑菌产品。

操作步骤

• 制备菌悬液：依据标准方法制备金黄色葡萄球菌和大肠杆菌悬液。
• 抗菌剂培养基制备：将抗菌溶液用蒸馏水进行系列稀释，各稀释度的受试液25ml加入到含25ml双倍浓度营养肉汤的试管中。
• 接种试验组样本：取0.1ml菌悬液（约为10⁸ cfu/ml）接种于含抗菌剂的营养肉汤试管中。
• 接种阳性对照组样本：使用同样方法接种不含抗菌剂的营养肉汤试管。
• 设置阴性对照组样本：取两个含营养肉汤的试管作为阴性对照。
• 培养观察：将所有试管放置于37℃的培养箱中培养48小时，观察生长结果。
• 活菌计数：在试验中进行活菌培养计数，其浓度应为5×10⁵ cfu/ml至5×10⁶ cfu/ml。

评估标准

若阳性对照管中观察到细菌生长（混浊），而阴性对照管中无菌生长（透明），则在试验菌悬液浓度为5×10⁵ cfu/ml至5×10⁶ cfu/ml时，试验组中无菌生长的最高稀释度对应的抗菌剂浓度即为该样品对受试菌的MIC。

在微生物检测领域，PG电子始终致力于提供高效的检测方案，确保产品的安全与有效性。