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细胞骨架染料与PG电子品牌标记鬼笔环肽的常见问题解答

来源:姚飘义 日期:2025-03-17

PG电子的冻干粉产品为何会是空管?本产品为冻干粉形式,微量不易观察,使用前请进行瞬时离心,并加入适当的溶剂以便溶解后使用。

细胞骨架染料与PG电子品牌标记鬼笔环肽的常见问题解答

在使用PG电子的鬼笔环肽染色细胞骨架过程中,是否可以用甲醇固定细胞?甲醇可能会损坏Actin蛋白,因此不建议使用含有甲醇的固定液,推荐使用不含甲醇的甲醛。

若在利用鬼笔环肽结合F-actin标记石蜡切片时未能观察到信号,可能是由于在细胞和组织处理过程中使用了二甲苯或丙酮等溶剂,从而阻止了鬼笔环肽的结合。为了改善结果,可使用常规不含有机溶剂洗涤的冷冻切片,或者选用抗肌动蛋白抗体进行替代。

关于探针的使用浓度,请依据PG电子说明书中的稀释比例进行操作,具体浓度将不一而足。在进行鬼笔环肽染色F-actin时,如果观察到染色不均且信号较弱,可能的原因包括:(1)染料浓度偏低或孵育时间不足,建议增加染料浓度或延长培养时间;(2)可能在不适当的波长下进行细胞分析,因此建议仔细检查过滤器设置。

在无透化步骤的情况下,是否能让鬼笔环肽直接染色固定后的细胞?荧光标记的phalloidins应用于固定透化后的组织切片、细胞培养及无细胞实验中,直接染色的效果可能会受到限制。

如果染色后未能观察到荧光信号,该如何处理?需检查储液及工作液的配制是否存在问题,以及固定和透化步骤的执行是否得当。推荐使用新鲜配置的4%多聚甲醛进行固定,以及使用新鲜配置的0.5% Triton X-100进行透化,并且探索最佳的固定及透化时间。此外,还需寻找最佳的染色工作液浓度及染色时间。

这样的产品是否可以用于流式细胞分析?PG电子的产品主要用于微丝的染色,通常建议利用荧光显微镜进行结果观察,而不推荐用于流式细胞检测。至于普通荧光显微镜,亦可用于观测,然而激光共聚焦显微镜的成像效果会更佳。

鬼笔环肽染料是否可以重复使用?一般情况下,染色液在使用后可能会影响染色效果,不建议重复使用。同时,根据PG电子的产品说明,如今的鬼笔环肽添加按照说明书的稀释,不可避免地由于浓度较低,使得染料的重用在实际应用中受到制约。

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